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本発明は、ヒト膵臓内分泌細胞の細胞集団を生成する方法であって、該方法は、(a)ヒト多能性幹細胞をアクチビンＡを追加した培地中で培養しヒト胚体内胚葉細胞へと分化させる工程、(b)前記ヒト胚体内胚葉細胞をPDX1及びNKX6.1を発現するヒト膵臓内胚葉細胞へと分化させる工程、及び(c）PDX1及びNKX6.1を発現するヒト膵臓内胚葉細胞を、ノギン、ALK5阻害剤II及び(2S, 5S)-(E, E)-8-(5-(4-(トリフルオロメチル)フェニル)-2, 4-ぺンタジエノイルアミノベンゾラクタムを追加した培地で培養することにより、NKX6.1及びインスリン、並びに最小量のグルカゴンを共発現するヒト膵臓内分泌細胞を生成する工程を含むことを特徴とする。