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本発明は、多能性幹細胞から色素幹細胞を製造する方法に関し、以下の工程を含むことを特徴とする；(a) 多能性幹細胞を浮遊培養して胚様体を形成させる工程、(b) 工程(a)で得られた細胞を、紡錘形で黒褐色の顆粒を含有する細胞が出現し始めるまで、メラノサイトへの分化を誘導する条件下で培養する工程、及び(c) 工程(b)で得られた細胞を、メラノサイトの維持培養条件下で培養する工程。