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本発明は、多能性幹細胞をフィーダー細胞不在下で未分化状態で維持する能力を有する培地に関し、該培地はアスコルビン酸（50μg／ml～1mg／ml）、bFGF（約1ng／ml～約10μg／ml）、異種成分不含血清代替物および脂質混合物を含む無血清および異種成分不含の培地であることを特徴とする。該培地はbFGF、TGFβ3およびアスコルビン酸を含む無血清および異種成分不含の培地、あるいはIL6RIL6キメラを含む無血清の培地であってもよい。