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本発明は網膜色素上皮細胞の製造方法に関し、(1)ヒト多能性幹細胞を無血清培地中で浮遊培養し凝集体を形成させる工程、(2)工程(1)で形成された凝集体をRax遺伝子発現細胞が出現するまでソニック・ヘッジホッグシグナル作用物質を含まずBMPシグナル作用物質を含む培地中で浮遊培養し網膜前駆細胞を含む凝集体を得る工程、および(3)工程(2)で得られた凝集体をソニック・ヘッジホッグシグナル作用物質及びＢＭＰシグナル作用物質を含まずWntシグナル作用物質を含む培地中で浮遊培養し、網膜色素上皮細胞を含む凝集体を得る工程を含む。