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本発明は、多能性幹細胞に対する増殖促進因子をスクリーニングする方法に関し、(a) L-アスコルビン酸、インスリン、トランスフェリン、セレン及び炭酸水素ナトリウムを含む無血清培地においてフィーダー細胞を培養し、生成した馴化培地を回収する工程、及び(b) 回収した馴化培地に含まれる多能性幹細胞に対する増殖促進因子を検出する工程を含む。本発明はさらに、当該馴化培地を用いて無フィーダー培養することを含む多能性幹細胞の増殖方法に関する。