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本発明は、ヒト多能性幹細胞（胚性幹細胞または誘導多能性幹細胞）をCD34+前駆細胞に分化させる方法に関し、以下の工程 (a)および(b)を含む； (a)ROCKインヒビターまたはミオシンＩＩインヒビターを含む培養培地中で多能性幹細胞を分散させる工程および前記分散させた細胞を10,000～50,000幹細胞/cm2培養面の密度で培養培地に播種する工程を含む、フィーダー細胞を含まない培養培地で多能性幹細胞を培養する工程、および(b)前記分散させた細胞を、胚様体を経ずに、5.5%未満の低酸素状態でBMP-4、VEGFおよびｂFGFからなる群より選択される少なくとも１種の組換え型増殖因子を含む分化培地中で分化させ、CD34+前駆細胞を得る工程。