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本発明は、ヒト多能性幹細胞を分化させる方法において、(a)前記ヒト多能性幹細胞を培養する工程、(b)工程(a)の後の多能性幹細胞を、ヒト膵臓由来間質細胞層上に蒔く工程、（ｃ）前記多能性幹細胞の分化を促進する少なくとも１つの因子で工程(b)の後の前記ヒト膵臓由来間質細胞層上の前記多能性幹細胞を処理して、膵内胚葉系譜または膵内分泌系譜に特有のマーカーを発現する細胞に分化させる工程を含み、前記膵内胚葉系譜に特有のマーカーを発現する細胞が胚体内胚葉系譜に特有のマーカーを発現する細胞から分化され、前記膵内分泌系譜に特有のマーカーを発現する細胞が前記胚体内胚葉系譜に特有のマーカーを発現する細胞から分化された前記膵内胚葉系譜に特有のマーカーを発現する細胞から分化される方法に関する。