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本発明は、網膜色素上皮細胞の製造方法に関し、下記（１）～（４）の工程を含む；（１）多能性幹細胞をWntシグナル経路阻害物質及び血清代替物を含む無血清培地中で浮遊培養し凝集体を形成させる第一工程、（２）第一工程で形成された凝集体を基底膜標品及び血清代替物を含む無血清培地中で浮遊培養する第二工程、（３）第二工程で培養された凝集体を血清培地中で浮遊培養する第三工程、および（４）第三工程で培養された凝集体をＧＳＫ３β阻害剤を含む血清培地（但し、前記血清培地とは、ソニック・ヘッジホッグシグナル経路作用物を含まない）中で浮遊培養する第四工程。