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本発明は、眼杯様構造体の製造方法に関し、下記（１）～（４）の工程を含む；（１）多能性幹細胞をWntシグナル経路阻害物質および血清代替物を含む無血清培地中で浮遊培養し凝集体を形成させる第一工程、（２）第一工程で形成された凝集体を基底膜標品および血清代替物を含む無血清培地中で浮遊培養する第二工程、（３）第二工程で培養された凝集体を血清培地中で浮遊培養する第三工程、および（４）第三工程で培養された凝集体をソニック・ヘッジホッグシグナル経路作用物質とWntシグナル経路作用物質とGSK３β阻害剤とを含む血清培地中で浮遊培養する第四工程。