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本発明は、凍結保護剤を含む凍結保存液を用いて多能性幹細胞または該多能性幹細胞が特定程度分化した特定分化細胞を凍結保存する細胞凍結保存方法に関し、該凍結保護剤としてグリセリンを２５℃～４２℃で、７．５容積％～２５容積％になるよう加え、－５℃／分以下の速度で緩速冷却して凍結することを特徴とする。